Polarimetria je optická výskumná metóda založená na schopnosti opticky aktívnych zlúčenín lineárne otáčať rovinu vibrácií polarizované svetlo(pozri izomerizmus).
Atómy a molekuly svietiacich telies vyžarujú elektromagnetické vlny. Pri úplnej poruche v usporiadaní týchto častíc telesá vyžarujú takzvané prirodzené svetlo, pri ktorom dochádza k oscilácii vektorov intenzity elektrického (alebo magnetického) poľa vo všetkých rovinách prechádzajúcich smerom šírenia svetelnej vlny. Usporiadanie v smere oscilácií poľa sa nazýva polarizácia svetla. Také svetlo, v ktorom dochádza k osciláciám intenzity elektrických (magnetických) polí v jednej rovine, sa nazýva rovinne polarizované svetlo a rovina, v ktorej intenzita osciluje magnetické pole svetelné lúče, - rovina polarizácie. Polarizované svetlo môže byť produkované prechodom prirodzeného svetla cez polarizačné hranoly vyrobené zo špeciálnych kryštálov. Medzi takéto kryštály patria islandské kryštály, z ktorých sa zvyčajne pripravujú polarizačné hranoly (Nicol hranoly). Pri prechode polarizovaného svetla cez roztok opticky aktívnej látky sa rovina polarizácie otáča, ale detegovať ju možno len pomocou druhého podobného polarizačného hranola (analyzátora). Štúdium rotácie roviny polarizácie sa používa na štúdium štruktúry opticky aktívnych zlúčenín, ako aj na ich kvantitatívne stanovenie. Optická aktivita je charakterizovaná hodnotou špecifickej rotácie [α], t.j. uhlom natočenia roviny polarizácie roztoku obsahujúceho 1 g opticky aktívnej zlúčeniny v 1 ml s hrúbkou vrstvy kvapaliny 1 dm.
Špecifická rotácia sa vypočíta z miery rotácie roztoku danej zlúčeniny so známou percentuálnou koncentráciou:
[a] = a100/l·C
kde α je uhol natočenia v stupňoch, C je koncentrácia v %, l je hrúbka vrstvy roztoku v dm. Špecifická rotácia sa mení s teplotou a vlnovou dĺžkou svetla. Preto sa stanovenie uskutočňuje v monochromatickom svetle pri určitej teplote. Vlnová dĺžka a teplota sú označené [a]. Keď poznáme špecifickú rotáciu danej zlúčeniny z referenčných tabuliek a určíme uhol rotácie roztoku tejto zlúčeniny, je ľahké vypočítať koncentráciu:
C = a100/[a]l
Roztok nesmie obsahovať iné opticky aktívne zlúčeniny.
Na určenie rotácie roviny polarizácie sa používajú optické prístroje-polarimetre. Polarimeter (obr. 1) pozostáva z dvoch polarizačných hranolov: pevného - polarizátora a otočného - analyzátora a skúmavky s testovacím roztokom. Uhol natočenia možno určiť nastavením analyzátora na rovnaké osvetlenie celého zorného poľa, najskôr bez roztoku a potom s roztokom opticky aktívnej zlúčeniny. V tomto prípade sa analyzátor musí otočiť pod uhlom, ktorý sa rovná uhlu natočenia roviny polarizácie skúmaného roztoku. Uhol natočenia sa meria v kruhu s dielikmi (limbo). Ak sa po inštalácii skúmavky s roztokom analyzátor otáča v smere hodinových ručičiek, potom hovoríme o pravom (+), ak proti smeru hodinových ručičiek, hovoríme o ľavom (-) otáčaní. Pre zlepšenie presnosti sú polarimetre vybavené ďalšími kremennými časťami. V niektorých polarimetroch sa vyrovnávanie osvetlenia po inštalácii roztoku a meranie koncentrácie opticky aktívnej látky uskutočňuje lineárnym pohybom kremenného klinu. Presnosť bežných polarimetrov je 0,05°. Na získanie monochromatického svetla sa zvyčajne používajú filtre. Polarimetrická metóda je široko používaná v laboratóriách; v klinických laboratóriách a laboratóriách potravinársky priemysel Na stanovenie obsahu cukru sa používa polarimetrická metóda. Polarimetre používané na stanovenie obsahu trstinového cukru sa nazývajú sacharimetre (obr. 2).
Ryža. 1. Schémy polarimetrov rôznych typov: a - systém s dvoma biquartzovými platňami; b - penumbrálne s nicol; c - penumbra s dvoma nicolmi. 1 - polarizátor; 1" a 1" - nicoli; 2 - biquartz doska; 3 - trubica s roztokom; 4 - analyzátor (vpravo - diagramy osvetlenia polarimetrických polí).
Ryža. 2. Klinový polarimeter-sacharimeter SOK (schéma): 1 - iluminátor; 2 - svetelný filter; 3 - membrána; 4 - šošovka; 5 - nikol; 6-skúmavka na testovací roztok; 7 - pevný kremenný klin; 8 - pohyblivý kremenný klin; 9 - analyzátor; 10-okulár; 11 - kryt; 12 - skrutka; 13 - lupa.
Konfiguráciu tejto látky možno korelovať s konfiguráciami kyseliny vínnej a ďalej s glyceraldehydom.
Otočenie roviny polarizácie
Jav rotácie roviny polarizácie svetelnej vlny o určitý uhol pri prechode svetla cez kryštalické telesá a niektoré izotropné kvapaliny sa nazýva rotácia roviny polarizácie alebo optická aktivita.
Ak látka nie je vo vonkajšom magnetickom poli, potom bude optická aktivita prirodzená.
Prirodzenú optickú aktivitu objavil v roku 1811 D. Arago na kremenných platniach, ktoré boli vyrezané kolmo na optické osi.
Pohľad pozorovateľa nech smeruje k dopadajúcemu lúču. Rotácie sa nazývajú pravotočivé (pozitívne), ak sa rovina polarizácie otáča pre pozorovateľa doprava (v smere hodinových ručičiek), a ľavotočivé (záporné), ak sa otáča doľava.
V prírode existujú dva typy kryštálov kremeňa, ktoré sú vzájomnými zrkadlovými obrazmi. Prvé otáčajú rovinu polarizácie doprava, ostatné doľava a nazývajú sa pravotočivý a ľavotočivý kremeň. Uhol natočenia roviny polarizácie je úmerný hrúbke vrstvy opticky aktívnej látky:
Obrázok 2
kde $l$ je dĺžka dráhy lúča v opticky aktívnom médiu; $α$ je koeficient proporcionality, ktorý sa nazýva rotačná kapacita alebo špecifická rotácia. Závisí to od povahy látky, teploty a vlnovej dĺžky.
Špecifická rotácia sa rovná uhlu, do ktorého sa rovina polarizácie monochromatického svetla vracia pri prechode cez vrstvu hrúbky $l$.
Ďaleko od pásov absorpcie svetla látky, závislosť spĺňa Biotov zákon:
Obrázok 3.
Pre opticky aktívne kvapaliny a roztoky J. Biot zistil, že uhol natočenia polarizačnej roviny je priamo úmerný hrúbke vrstvy $l$ a koncentrácii $C$ opticky aktívnej látky, tj.
Obrázok 4.
kde $[α]$ je koeficient proporcionality, ktorý sa nazýva špecifická rotácia riešenia. Koeficient závisí od povahy opticky aktívnej látky a rozpúšťadla, teploty a vlnovej dĺžky svetla.
Vlastnosti optická aktivita roztoky umožňujú určiť ich koncentrácie. Prístroje používané na vykonávanie takýchto meraní sa nazývajú polarimeter. Pretože špecifická rotácia pre cukrový roztok je významná, polarimetre sú široko používané v sacharimetrii.
Teóriu rotácie roviny polarizácie opticky aktívnymi látkami vypracoval A. Fresnel. Veril, že tento jav je spôsobený špeciálnym typom dvojitého lomu lúčov, pri ktorom je rýchlosť šírenia svetla v aktívnom prostredí odlišná pre lúče s pravou a ľavou kruhovou polarizáciou. Znamienko uhla natočenia roviny polarizácie je určené pomerom medzi rýchlosťami šírenia lúčov pravostrannej cirkulačnej polarizácie a ľavostrannej cirkulačnej polarizácie. Pre opticky aktívne médium bude pozitívne a pre to bude negatívne.
Lineárne polarizované monochromatické svetlo sa na vstupe do opticky aktívnej látky rozkladá na dve vlny rovnakej frekvencie, ale kruhovo polarizované vo vzájomne opačných smeroch:
Obrázok 5.
Vektory a tieto vlny sú symetrické vzhľadom na $p - p$ rovinu kmitov dopadajúceho svetla.
Pri opustení opticky aktívneho prostredia s hrúbkou vrstvy $l$ sa elektrický vektor pravostrannej cirkulačnej vlny vráti do väčšieho uhla ako pre ľavostrannú cirkulačnú vlnu. V dôsledku toho bude rovina, voči ktorej sú elektrické vektory týchto vĺn umiestnené symetricky, otočená doprava pod uhlom vzhľadom k rovine polarizácie dopadajúcej vlny.
Uhly rotácie elektrického vektora pravej a ľavej vlny závisia od času šírenia vlny $t$ a dĺžky ich dráhy v opticky aktívnom prostredí.
V roku 1845 M. Faraday zistil, že keď sa lineárne polarizované svetlo šíri v opticky neaktívnych látkach v smere magnetického poľa, rovina polarizácie sa otáča o určitý uhol. Ak sa pozorovateľ pozerá v smere magnetického poľa, potom otáčanie doprava sa považuje za pozitívne, otáčanie doľava je záporné.
Pomocou rotácie roviny polarizácie
Špecifická hodnota rotácie je určená na potvrdenie čistoty a identity opticky aktívnej látky. Keďže špecifická rotácia závisí od koncentrácie a charakteru rozpúšťadla, podmienky na jej stanovenie sú uvedené v príslušných monografiách pre liečivá.
V koncentračnom rozsahu, pri ktorom je špecifická rotácia konštantná, môžete pomocou uhla rotácie vypočítať koncentráciu látky v roztoku:
Poznámka 1
Môžeme teda konštatovať, že polarimetria ako analytická metóda sa používa v kvalitatívnej aj kvantitatívnej farmaceutickej analýze.
Stanovenie čistoty glukózy a kyseliny askorbovej
Stanovenie špecifickými hodnotami optickej rotácie je založené na meraní uhla natočenia $(α)$ roztokov glukózy a kyseliny askorbovej a na výpočte špecifickej optickej rotácie. za 10 % vodný roztok glukóza, špecifická hodnota optickej rotácie sa pohybuje od + 51,3 ° do + 53,0 °; pre 20% roztok kyseliny askorbovej od + 22 ° do + 24 °.
Získané hodnoty sa porovnajú s tabuľkovými údajmi a vyvodia sa závery o súlade testovaných látok s normami kvality.
Identifikácia pravotočivého a ľavého gáforu
Táto definícia je založená na meraní uhla natočenia roviny polarizácie alkoholických roztokov gáfru. Gáfor získaný z gáfrovníka je pravotočivý, z jedľového oleja je ľavotočivý izomér, syntetický gáfor je opticky neaktívna látka. Špecifická optická rotácia 10% roztoku gáfru v 95% alkohole pre pravotočivý gáfor je od + 41 ° do + 44 °, pre ľavostranný gáfor od -39 ° do -44 °.
Naplňte polarimetrickú trubicu kvapalinou alebo roztokom známej koncentrácie pevný, zopakujte vyššie uvedené operácie a určte uhol natočenia na stupnici prístroja. Stanovenie uhla natočenia sa opakuje najmenej 5-krát a vypočíta sa jeho priemerná hodnota. Uhol natočenia je algebraický rozdiel medzi získanou hodnotou a nulovým bodom. Zmeria sa uhol rotácie pripravených roztokov s pravotočivým a ľavostranným rotujúcim gáforom a vyvodia sa závery o identifikácii skúmanej látky.
Ukazovateľom kvality sacharidových prípravkov je špecifická rotácia roztokov, ktorá charakterizuje optickú aktivitu. Na stanovenie špecifickej rotácie sa glukóza predsuší pri 100 - 105 °C na konštantnú hmotnosť. Uhol rotácie glukózy a mliečneho cukru sa meria pomocou polarimetra po predbežnom pridaní dvoch kvapiek roztoku amoniaku do testovaného roztoku. To urýchľuje proces mutarotácie. Je spojená s nastolením rovnováhy pri tvorbe dvoch epimérov. Tým sa vytvorí priemerná hodnota špecifickej rotácie roztoku glukózy.
2. Obdobne prebieha proces epimerizácie mliečneho cukru Pôsobením kyseliny alebo enzýmu invertázy sa hydrolyzuje sacharóza. Výsledná zmes D-glukózy a D-fruktózy sa nazýva invertný cukor. Táto zmes je ľavotočivá, pretože jej optické vlastnosti vznikajú vďaka špecifickej rotácii glukózy (+52,5°) a ľavotočivej fruktózy (-93°).
Glukóza - špecifická rotácia od + 52 do + 53 ° (10% vodný roztok).
Mliečny cukor - špecifická rotácia od + 52 do + 53,5 ° (5% vodný roztok).
Sacharóza - špecifická rotácia od + 66,5 do + 66,8 ° (10% vodný roztok).
3. Autenticita glukóza a laktóza sa vytvárajú zahrievaním roztokov prípravkov s Fehlingovým činidlom do varu. V tomto prípade glukóza tvorí tehlovočervenú zrazeninu oxidu meďného (I). Laktóza za rovnakých podmienok poskytne žltú zrazeninu, ktorá sa zmení na hnedočervenú. Sacharóza, na rozdiel od glukózy a laktózy, neznižuje Fehlingovo činidlo.
4. Keď sa glukóza a laktóza vystavia pôsobeniu roztoku dusičnanu strieborného v amoniaku, uvoľní sa čierna zrazenina striebra.
Sacharóza nereaguje pozitívne s fenylhydrazínom.
7. Vplyvom minerálnych kyselín resp kyselina šťaveľová Mono- a disacharidy sa pri zahrievaní v skúmavke na plameni horáka premieňajú na furfural alebo jeho deriváty (disacharidy sa najskôr hydrolyzujú na monosacharidy). Z hexóz (glukózy) vzniká hydroxymetylfurfural a z pentóz (fruktóza) - furfural:
Furfural alebo hydroxymetylfurfural, ktoré sú prchavými zlúčeninami, interagujú s anilínom alebo novokaínom aplikovaným na filtračný papier, ktorý pokrýva skúmavku. Najprv sa vytvoria Schiffove bázy, ktoré majú svetložltú farbu a potom sa otvorí furánový kruh a získa sa polymetínové farbivo - derivát oxyglutakónového aldehydu (malinovo-fialová farba):
9. Prítomnosť hydroxylových skupín je možné dokázať aj acetylačnou reakciou.
10. Zisťovanie pravosti škrobu sa vykonáva: naliatím do 100 ml vriacej vody za stáleho miešania zmesi škrobu a vody (1:5) a následným varom 2-3 minúty vznikne mierne priehľadná belavá pasta s vzniká modrastý odtieň neutrálnej alebo mierne kyslej reakcie.
Pridaním 1 kvapky 0,5% roztoku jódu do vychladnutej škrobovej pasty sa objaví modrá farba.
Škrobová pasta sa používa ako indikátor pri jodometrickej titrácii.
Špecifická rotácia polarizačnej roviny opticky účinná látka je definovaný ako uhol natočenia na jednotku hrúbky skúmaného materiálu:
Ak sa uhol natočenia meria v uhlových stupňoch a hrúbka vrstvy l- v mm, potom bude špecifický rozmer otáčania [stupeň/mm].
V súlade s tým je špecifická rotácia opticky aktívnej kvapaliny (nie roztoku) s hustotou c [g/cm 3 ] určená výrazom
Pretože optická aktivita kvapalín je oveľa menšia ako optická aktivita pevné látky a hrúbka vrstvy kvapaliny sa meria v decimetroch, potom má špecifická rotácia kvapalín rozmer [deg cm-3 / (dm g)].
Špecifická rotácia roztoku opticky aktívnej látky v opticky neaktívnom rozpúšťadle s koncentráciou S(g/100 ml) roztoku sa určí podľa vzorca
V organickej chémii sa hodnota molárnej rotácie používa aj ako typ špecifickej rotácie.
Stanovenie koncentrácie rozpustených opticky aktívnych látok na základe výsledkov merania uhla natočenia b [°] pri danej hrúbke vrstvy l[dm] pre určitú vlnovú dĺžku [nm] sa získa Biotovou rovnicou (1831):
Biotov zákon je takmer vždy splnený v oblasti nízkych koncentrácií, zatiaľ čo pri vysokých koncentráciách dochádza k významným odchýlkam
Rušivé faktory v polarimetrických meraniach
Každým lomom a odrazom od povrchu, ktorý nie je kolmý na smer svetla, nastáva zmena stavu polarizácie dopadajúceho svetla. Z toho vyplýva, že akýkoľvek druh zákalu a bublín v testovanej látke v dôsledku množstva povrchov značne znižuje polarizáciu a citlivosť merania sa môže znížiť pod prijateľnú úroveň. To isté platí pre nečistoty a škrabance na okienkach kyviet a ochrannom skle svetelného zdroja.
Tepelné a mechanické namáhanie ochranných skiel a okienok kyviet vedie k dvojitému lomu a následne k eliptickej polarizácii, ktorá sa superponuje s výsledkom merania vo forme zdanlivej rotácie. Keďže tieto javy sú vo väčšine prípadov nekontrolovateľné a nie sú konštantné v priebehu času, treba dbať na to, aby sa v optických prvkoch neobjavilo mechanické namáhanie.
Silná závislosť optickej aktivity od vlnovej dĺžky (rotačná disperzia), ktorá je napríklad pre sacharózu 0,3 %/nm v oblasti viditeľného svetla, si vynucuje použitie extrémne úzkych spektrálnych pásiem v polarimetrii, ktoré sa zvyčajne vyžaduje len v interferometrii. Polarimetria je jednou z najcitlivejších optických meracích metód (pomer prahu citlivosti k rozsahu merania je 1/10000), preto pre plnohodnotné polarimetrické merania je možné použiť iba striktne monochromatické svetlo, t.j. izolované čiary spektra. použiť. Horáky vysoký tlak, ktoré poskytujú vysokú intenzitu svetla, sú pre polarimetriu nevhodné kvôli expanzii spektrálne čiary so zmenou tlaku a zvýšeným podielom súvislého radiačného pozadia pre tento prípad. Použitie širších spektrálnych pásiem je možné len pri prístrojoch, ktoré poskytujú kompenzáciu rotačnej disperzie, ako napríklad pri prístrojoch s kompenzáciou pomocou kremenného klinu (sacharimeter s kremenným klinom) a prístrojoch s kompenzáciou Faradayovým efektom. Prístroje s kremenným klinom majú obmedzené možnosti kompenzácie pri meraní sacharózy. Kompenzáciou Faradayovho efektu vhodným výberom materiálu môže byť rotačná disperzia vystavená rôznym požiadavkám; nie je však možné dosiahnuť univerzálnosť použitých metód.
Pri meraní s konečnou šírkou spektrálneho pásma v blízkosti absorpčných pásiem dochádza vplyvom absorpcie k posunu efektívneho ťažiska rozloženia vlnových dĺžok skresľujúcim výsledky merania, z čoho vyplýva, že pri štúdiu absorbujúcich látok je potrebné pracovať s prísne monochromatickým žiarením.
Pri monitorovaní rýchlo tečúcich kontinuálnych tokov roztokov môže eliptická polarizácia vyplývajúca z dvojitého lomu svetla tokom zhoršiť citlivosť polarimetrických metód merania a viesť k hrubým chybám. Tieto ťažkosti možno odstrániť len starostlivým tvarovaním prúdenia, napríklad zabezpečením laminárneho paralelného prúdenia v kyvetách a znížením jeho rýchlosti. polarizácia svetla rotácia optický
Opticky aktívne látky majú optickú aktivitu, schopnosť otáčať rovinu polarizácie polarizovaného lúča svetla. Optická aktivita zlúčenín je spôsobená chiralitou ich molekúl a absenciou prvkov symetrie.
V závislosti od povahy opticky aktívnej zlúčeniny sa rotácia roviny polarizácie môže meniť v smere a uhle rotácie. Ak sa rovina polarizácie otáča v smere hodinových ručičiek, smer otáčania je označený znamienkom „+“, ak proti smeru hodinových ručičiek, znamienkom „-“. V prvom prípade sa látka nazýva pravotočivá a v druhom - ľavotočivá. Veľkosť odchýlky roviny polarizácie od počiatočnej polohy, vyjadrená v uhlových stupňoch, sa nazýva uhol natočenia a označuje sa gréckym písmenom a.
Uhol natočenia závisí od charakteru a hrúbky opticky aktívnej látky, teploty, charakteru rozpúšťadla a vlnovej dĺžky svetla.
Pre porovnávacie posúdenie schopnosti rôznych látok otáčať rovinu polarizácie svetla sa vypočítava špecifická rotácia [a]D>. .Veeey rotácia je konštanta opticky aktívnej látky, rotácia roviny polarizácie monochromatického svetla spôsobená vrstvou opticky aktívnej látky s hrúbkou 1 dm pri prepočte na obsah 1 g látky v 1 ml objemu:
kde a je nameraný uhol natočenia, stupne; D je vlnová dĺžka monochromatického svetla; t je teplota, pri ktorej sa meranie vykonalo; / - hrúbka vrstvy, dm; C je koncentrácia roztoku vyjadrená v gramoch látky na 100 ml roztoku.
Typicky sa špecifická rotácia určuje pri 20 °C a vlnovej dĺžke zodpovedajúcej sodíkovej D čiare (À, = 589,3 nm).
Pre kvapalné látky špecifická rotácia
kde d je hustota kvapalnej látky, g/ml.
Často sa namiesto špecifickej rotácie vypočíta molárne e-ù^Hèe (pomocou nasledujúceho vzorca:
do 100", kde M je molekulová hmotnosť.
Uhol natočenia sa meria pomocou iolarimeyag-roe (obr. 1.101), čo umožňuje získať výsledky s presnosťou ±0,02°.
Princíp činnosti polarimetra je nasledovný: lúč rozptýleného svetla vyžarovaný zo zdroja - sodíkovej výbojky 1 - prechádza cez polarizátor 3 (Nicolasove hranoly) a mení sa na rovinne polarizovaný. Tento lúč sa líši od prirodzeného v tom, že oscilácie vektorov elektromagnetického poľa sa vyskytujú v jednej rovine, nazývanej polárna rovina.
Ryža. 1.101. polarimeter:
1 - svetelný zdroj; 2 - dichromatický filter; 3 - polarizačné Nicolasove hranoly (polarizátor); 4 - kyveta s roztokom látky; 5 - Nicolas analyzujúci hranol (analyzátor); 6 - mierka; 7 - okulár; 8 - ovládacia rukoväť analyzátora
cie. V dráhe polarizovaného lúča je umiestnená kyveta s opticky aktívnou látkou 4, schopná otočiť rovinu polarizácie doľava alebo doprava o určitý uhol. Na meranie uhla natočenia a je namontovaný ďalší Nicolasov hranol - analyzátor 5. Otáčaním doprava alebo doľava sa dosiahne úplné zhasnutie lúča stretávacieho svetla. Uhol, o ktorý sa analyzátor otočil, je pozorovaná optická rotácia. Hodnota uhla sa zaznamenáva na stupnici 6.
Technika merania. Najprv sa nastaví nulová poloha hranolov. Za týmto účelom sa do prístroja vloží prázdna kyveta 4, ak sa skúma čistá kvapalná látka, alebo skúmavka naplnená rozpúšťadlom. Elektrická žiarovka 1 je inštalovaná pred prístrojom, ak má prístroj zabudovaný žltý filter. Potom sa hranoly analyzátora privedú do polohy, v ktorej majú obe zorné polia rovnaké osvetlenie. Toto sa opakuje trikrát a zo získaných odčítaní sa vezme priemerná hodnota, ktorá sa berie ako nulová poloha hranolov. Potom sa umiestni skúmavka s testovacím roztokom alebo kvapalinou a ako je uvedené vyššie, odčítajú sa polarimetre.
Príprava roztoku. Opatrne odvážená vzorka s hmotnosťou 0,1 – 0,5 g sa rozpustí v odmernej banke v 25 ml rozpúšťadla. Typicky sa ako rozpúšťadlá používa voda, etanol a chloroform. Roztok by mal byť priehľadný, bez nerozpustných suspendovaných častíc a ak je to možné, bezfarebný. Ak sa získa nepriehľadný roztok, musí sa prefiltrovať cez papierový filter, zlikvidovať prvú časť filtrátu a naplniť druhú časť polarimetrickej skúmavky a pokračovať v stanovení.
Plnenie polarimetrickej trubice. Jeden koniec polarimetrickej bunky 4 (obr. 1.101) je zaskrutkovaný pomocou trysky. Skúmavka sa umiestni vertikálne a naplní sa roztokom, kým sa nad horným koncom trubice nevytvorí okrúhly meniskus. Na koniec trubice sa umiestni sklenená platňa tak, aby v trubici nezostali žiadne vzduchové bubliny, a potom sa naskrutkuje mosadzná tryska.
Pozor/ Medzi sklo a mosadznú trysku je umiestnená gumená podložka. & nemožno umiestniť medzi koniec sklenenej trubice a sklenenú výstelku, pretože kontakt sklo-sklo by sa zlomil.
Polarimetrická trubica naplnená roztokom sa umiestni do polarimetra a otáčanie sa meria odčítaním stupnice. Vykonajú sa aspoň tri merania a získané údaje sa spriemerujú. Pozorovaná rotácia sa vypočíta ako rozdiel medzi získaným a nulové hodnoty. Tento výsledok sa použije na výpočet špecifickej rotácie pomocou jedného z uvedených vzorcov. Vypočítané hodnoty [a]^ sú porovnané s údajmi z literatúry.
PRACTICUM
Cvičenie. Určte špecifickú rotáciu vo vode pri 20 °C týchto látok: glukóza, X)-ribóza, kyselina X-askorbová, arbutín, maltóza, sacharóza, glykogén, kyselina β-askorbová.